2025年9月3日,中国科学院微生物研究所&中国兽医药品监察所国家/WOAH猪瘟参考实验室&中国农业大学动物医学院等研究人员在Journal of Virology上发表题为“An attenuated African swine fever virus with deletions of the CD2v and A137R genes offers complete protection against homologous challenge in pigs”的研究论文。
该研究以ASFV基因型II毒株 HuB/HH/2019为骨架,利用CRISPR技术对ASFV毒力基因CD2v、A137R进行敲除,构建了基因缺失减毒毒株HuBΔCD2vΔA137R。研究人员将该减毒毒株作为靶疫苗,进行了免疫攻毒保护试验验证,建立了一套体内、体外多层次的ASF候选疫苗安全性和有效性评价范式和方法。
研究人员将HuBΔCD2vΔA137R毒株以105 TCID50剂量肌肉注射接种仔猪,对动物的症状、病毒血症和排毒带毒情况,以及特异性抗体、细胞因子、外周血淋巴细胞(PBMC)RNA转录组测序等可以反应体液免疫和细胞免疫水平等指标进行27天监测。用亲本毒株HuB/HH/2019以102 HAD50剂量肌肉注射攻毒,攻毒后22天内监测动物的症状、病毒血症和排毒、带毒以及剖检组织中的病毒载量。
结果显示,所有接种HuBΔCD2vΔA137R的仔猪在观察期内均未表现出明显的高热(>40.5℃)和严重的ASF症状,仅出现轻度病毒血症,并在接种24天后清除,同时,诱导产生了高水平ASFV抗体。免疫仔猪攻毒后均全部存活,且在22天监测期内,未出现任何发热或症状。与此相反,对照组仔猪攻毒后11天内表现出明显ASF症状并全部死亡。对接种动物细胞因子、外周血淋巴细胞RNA转录组测序分析结果显示,基因缺失减毒毒株可以激发机体产生先天和被动免疫反应。
中国科学院微生物研究所高福院士、中国兽医药品监察所国家/WOAH猪瘟参考实验室刘业兵研究员为共同通讯作者。中国农业大学、中国科学院微生物研究所联合培养博士、中国兽医药品监察所国家/WOAH猪瘟参考实验室副研究员彭国瑞,中国科学院微生物研究所研究员赵欣,中国兽医药品监察所国家/WOAH猪瘟参考实验室研究员邹兴启为论文共同第一作者。该研究得到了国家重点研发计划、国家自然科学基金等项目资助。相关研究数据上传至中国国家微生物、基因组科学数据平台。
原文链接:https://journals.asm.org/doi/10.1128/jvi.00262-25
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